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產品名稱:瓊脂糖凝膠CL-4B

產品型號:

產品報價:

產品特點:瓊脂糖凝膠CL-4B
是在瓊脂糖凝膠4B的基礎上通過交聯使微球的剛性增強,理化性能提高,有利用于工業生產。

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瓊脂糖凝膠CL-4B的詳細資料:

瓊脂糖凝膠CL-4B

貨號:S8741

規格:10ml/100ml/500ml

產品說明 

瓊脂糖凝膠CL-4B是在瓊脂糖凝膠4B的基礎上通過交聯使微球的剛性增強,理化性能提高,有利用于工業生產。該介質用于生物大分子的凝膠層析。本品呈白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質。本產品具有很高的化學穩定性、高流速、較好的機械性能、可多次重復使用等特點,非特異性吸附低,回收率高,可用有機溶劑及1~2mol/L 的NaOH在位清洗,適用于工業規模生產,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質、核酸及多肽的凝膠色譜純化。

項目

說明

基質

4%交聯瓊脂糖

排阻極限

6×104~2×107 (球蛋白)

形狀

球形

粒徑

45~165 μm

檢測流速

30 cm/h*

耐熱

pH7水中12020min

耐壓

0.025 MPa

pH穩定性

3~13(長時間),2~14(短時間,在位清洗)

化學穩定性

可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍;可耐有機溶劑,如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈

檢測條件

層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25,流動相為0.1mol/LNaCl

 

瓊脂糖凝膠CL-4B操作步驟:(僅供參考)

1、裝柱

凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。

以下過程為通用介質裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩定后將柱床壓緊,接好管路。

(1)讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

(2)選擇一根一定直徑的柱子,長約30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。

(3)將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。

(4)用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。

5打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩定。用緩沖液平衡柱子,到柱床穩定。

6)推薦用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。

2、平衡:讓緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。

3、上樣:

(1)樣品用緩沖液配制,要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理,再上樣。

(2)介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的,分子量大的先流出來。

(3)上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。

4、洗脫:用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

5、再生:一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。

6、在位清洗

(1)對于以離子鍵結合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除。

(2)對沉淀蛋白、對以疏水性結合的蛋白或脂類,可用1M NaOH 去除。

(3)對強疏水性結合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產生氣泡。

清洗完畢后,用少3倍緩沖液平衡柱子。

7、去熱源

用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉24小時。或用以下方法步驟去除:

(1)2倍柱體積的70%乙醇;

(2)2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;

(3)1倍柱體積4M尿素;

(4)3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M NaCl;

以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。

8、 消毒:用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。

注意事項

在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入

產品應密封貯存在4~25(保存溶液為20% 乙醇),通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。

用過的柱子貯存在4(20% 乙醇)。

本產品避免與氧化劑接觸;避免長時間暴露在空氣中

保質期:5年。

 

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